免疫组化实验中如果二抗是山羊来源的,需要使用聚合物辅助剂,但是我不明...
源性一抗如果需要做共定位免疫组化abc复合物用什么配,那么就需要不同源性免疫组化abc复合物用什么配的且要能够用于人组织的,可以做组化的,二抗建议选择驴抗,这样用处多免疫组化abc复合物用什么配;如果说是做组织化学,那么一抗源性就无所谓了只要能用于人的组织,二抗相应配套就行。
种属来源要匹配免疫组化abc复合物用什么配:根据所用一抗选定二抗。一般来说,如果一抗是小鼠源性,二抗应选择兔/山羊或其它种属抗小鼠的抗体。
一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。
如要标记大鼠的actin蛋白,那么去买一支可识别大鼠actin的抗actin一抗(它可能同时也能识别其它动物的,这个没关系),它一般来源于常见动物如兔,马,羊等。
免疫组化操作步骤 一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行 缓冲液洗 3min/2 次。
2%BSA做免疫组化怎样配置
1、建议用血清稀释,最理想的 *** 是用二抗同种属的血清,如二抗是山羊的,用山羊血清,或者是用2%BSA,前提是一抗不是牛的。也就是说,一抗是羊的,小鼠的,兔子的,都可以用BSA。
2、取1g BSA,加蒸馏水,定容到100ml就行了。一般常见的稀释液是自己配置5%脱脂奶粉或者5%BSA溶液。 最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的BSA,封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。
3、IHC 一抗稀释比例可以参考说明书,抗体稀释液的成分都大同小异,主要就是BSA+PBS/TBS,所以一般的抗体稀释液就能用了。
一步法免疫组化和SP法免疫组化有什么区别
1、原理不同:免疫组化利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。
2、免疫组化技术是一种综合定性、定位和定量;形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测出病原的同时,还能观察到组织病变与该病原的关系,确认受染细胞类型,从而有助于了解疾病的发病机理和病理过程。
3、灵敏度高而极易控制背景的检测系统试剂盒是最为理想也是免疫组化染色优劣的关键,根据免疫组化技术发展至今PV系列及SP试剂盒更优于其它试剂盒。检测系统应与一抗来源相匹配,否则检不出目的物。
4、一个链霉亲和素可以和4个生物素结合,假设完全理想的状态,二抗的生物素占去一个位点,还有3个位点可以结合带有生物素的HRP,也就是变成了一分子链霉亲和素带有3分子的HRP,酶量增加了,当然灵敏度也就相应的提高了。
5、一个是组织切片,一个细胞爬片。免疫组化需要进行抗原修复,石蜡切片还需脱蜡处理,免疫细胞化学要用Triton X-100打孔,其他基本相同。二者抗体可以通用。原理是一样的。
6、SP法(抗生物素蛋白链酶素-过氧化物酶复合物) 本身没有连接生物素,但有两个生物素亲和力极高的结合位点,可以与二抗上的生物素结合,敏感性高,复合物不需要使用前混合,更为简便。
c-cas3用什么配二抗
二抗是指防腐剂,化学名为对羟基苯甲酸酯类物质,在食品加工中可以用于保持食品的稳定,防止色变,抑制微生物的生长和繁殖。二抗在食品中添加的量很少,一般不会对人体造成危害。二抗的保存时间主要取决于其保存条件和环境。
PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点TritonX100效果好。培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。
配液1:衍生化试剂 11mg 2-硝基苯甲醛 加甲醇10ml溶解(浓度为10mM)。 配液2:用去离子水将2×浓缩复溶液与去离子水按1:1体积比进行稀释(1份浓缩复溶液+1份去离子水)用于抗体稀释和样本的复溶。
免疫组化原理、流程及结果分析
1、免疫组化实验程序目前比较常用的有两个:三步法和二步法。前者在较长时间内一直是免疫组化的标准程序,目前该法仍在使用。后者是近年来(1995年)推出的灵敏度比较高的 *** ,操作较三步法便捷,但价格也高于前者。
2、免疫组化技术是一种综合定性、定位和定量;形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测出病原的同时,还能观察到组织病变与该病原的关系,确认受染细胞类型,从而有助于了解疾病的发病机理和病理过程。
3、Elivision二步法免疫组化染色步骤 1 石蜡印片脱蜡和水化后,用PBS(pH4)冲洗二次,每次3分钟(3x3min)2 根据每种抗体的要求,对组织抗原进行相应的修复。
4、临床上的免疫组化检查是指应用免疫学基本原理――抗原与抗体特异性结合,通过化学反应使标记抗体的显色剂显色,从而确定组织细胞内的抗原(多肽和蛋白质),并对其进行定位、定性及定量。