免疫组化原理、流程及结果分析
1、免疫组化实验程序目前比较常用一抗为什么标记hrp的有两个一抗为什么标记hrp：三步法和二步法。前者在较长时间内一直是免疫组化的标准程序，目前该法仍在使用。后者是近年来（1995年）推出的灵敏度比较高的 *** ，操作较三步法便捷，但价格也高于前者。
2、Elivision二步法免疫组化染色步骤 1 石蜡印片脱蜡和水化后，用PBS(pH4)冲洗二次，每次3分钟(3x3min)2 根据每种抗体的要求，对组织抗原进行相应的修复。
3、免疫组化检查结果可能是为了检测是否患有恶性淋巴瘤，淋巴细胞反应性增生可能是最后的诊断结果，即在某种因素的 *** 下诱发了淋巴细胞的增生一抗为什么标记hrp；也可能是淋巴瘤引发的。前者是一个良性的过程，而后者则是恶性疾病。
4、专业一点，免疫组化包括免疫组织化学和免疫细胞化学，即IHC和ICC。
5、免疫组化的优势在于其空间定位，来反映一抗为什么标记hrp你所检测的因子的功能变化过程。在实验前，一抗为什么标记hrp你就应该根据文献估计你检测因子的表达部位，阳性表达率，再根据你所做的阳性和阴性对照片读片，并分析各种结果的原因。
...需要用PBS或PBST洗涤滤膜,然后进行一抗孵育
1、一抗可以反复使用2-3次。PBST 溶液 PBS 溶液中加入 0.1%吐温 洗膜：用PBST进行洗膜，10min/次，洗3-4次即可。二抗孵育：洗膜结束后，后加入0.3%二抗+3%奶粉5mL孵育1h，再次洗膜。
2、一抗建议回收，放-20℃或-80℃保存。若是检测多个指标，所用一抗必须是不同来源。孵育二抗：回收一抗，加0.1%的PBST 清洗3次，3-5min/次。吸干PBST。
3、加入一抗在湿盒内孵育细胞片（在使用含1% BSA PBST稀释抗体的），室温1小时或4 ℃过夜。缓慢倒出溶液，PBS清洗细胞片的3次，每次5分钟。加入含1 ％BSA的二抗稀释液，室温避光孵育1小时（避光）。
4、抗体往往是以极高浓度保存在甘油之中的，使用的时候按照一定的比例去稀释，TBST跟TBS都可以用来稀释抗体，以做孵育抗体之用，PBST跟PBS不清楚，有人用PBS稀释的，PBST没见过有人用过，其实按照道理来说是可以使用的。
tmb和hrp显色原理
1、答案如下：TMB是一种优于0PD的新型HRP色原底物。其氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数，假如HRP量少，过氧化氢溶液和TMB过量时，则形成蓝色的阳离子根。降低pH，即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌。
2、我说我们这边吧。HRP是辣根过氧化酶，我们显色液是A液，和B液，A液里是过氧化脲，B液里是TMB。HRP催化A液和B液反应，A提供O，B提供H。反应生成的物质是蓝色。终止后是黄色。
3、用纯化的大肠杆菌内毒素(endotoxin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内毒素(endotoxin)，再与HRP标记的内毒素(endotoxin)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
ELISA法检测抗原的双抗体夹心法的一些困惑
1、我也问过这个问题。听别人给我解释，说可以直接标记在一抗上然后加底物显色，但是那样的话，放大效果没有加二抗的好。
2、ELISA实验所有 *** 的缺点很明显：重复性不好；收自身抗体、嗜异性抗体等干扰，易出现假阳性；不论仪器和手工操作，干扰因素较多。影响最大的是温度和时间。
3、双抗体夹心ELISA通常包括直接法和间接法两种 *** 。这两种 *** 在灵敏度和特异度上有一些差别，具体如下： 灵敏度：直接法的灵敏度比间接法高，因为直接法中检测到的目标抗原分子已经被检测抗体所夹持，因此更容易被检测到。