油红染色失败的原因
染色液失效。是诱导没有成功,看不到明显的脂滴或者看到的是细胞空泡,若看到明显的脂滴但是染不上色,便是是染色液失效。油红是红棕色粉末;易溶于苯,溶于氯仿、冰乙酸、乙醚、乙醇、丙酮、石油醚、不挥发油、热甘油和挥发油,不溶于水。
油红染色能染什么细胞 原理是什么
油红o染色液主要由油红o异丙醇饱和液组成油红,利用染料易溶于脂质油红的性质证明组织脂质含量的多少。适用于细胞学与组织学研究的切片观察.但渗透慢,不能长期保存;冰冻切片附贴于载玻片后,立即放入恒冷箱中的固定液固定1分钟后即可染色。?染色后脂滴呈橘红色。下面来了解一下油红o染色步骤有哪些。
油红o染色步骤
试剂:
0.5%的油红o溶液
配方(100ml)油红:
油
红o
:
1.5g
70%乙醇
:
50ml
丙酮
:
50ml
需要的其油红他试剂:异丙醇、乙醇、丙酮、苏木素(hematoxylin)
染色步骤:
1.将冰冻切片(厚度为4-8um)常温干燥15-20min.
2.100%异丙醇孵育5分钟(避免把水带入油红o)。
3.0.5%的油红o溶液孵育7-8分钟(在60
oc烤箱)
4.85%异丙醇溶液洗3分钟
5.双脱水洗。
6.苏木素染1-1.5min。
7.双脱水洗。
8.封片剂封片
结果:
脂质呈红色或者橘黄色
细胞核呈淡蓝色
油红o染色步骤注意事项:
1
由于脂肪易溶于有机溶剂,所以一般用冰冻切片染色来显示。
2
作脂肪染色的冰冻切片不能太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。
3
苏木素复染时间不能过长。
4
染色结果不能长期保存,应尽快观察。
以上便是油红o染色步骤,油红o染色常用作染脂肪。脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹ⅲ,苏丹ⅳ,苏丹黑及油红o等。脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。
油红o4度可以保存多久
一个星期
配好的溶液1个星期内有效 , 最好4度保存 。
2、染色液的配制 材料油红染料 棕色可密封瓶 异丙醇 研钵 漏斗 定性滤纸 称取预先研磨粉碎的0.5g油红干粉 , 溶于少量异丙醇中 , 然后加异丙醇至100ml , 棕色瓶密封或锡箔纸包裹避光4保存 , 为储存液 , 可长期保存 。
用时取6ml加三蒸水4ml混匀 , 定性滤纸过滤 , 稀释后数小时内用完 。
油红-o染色的技术和步骤
试剂配制油红:
油红O 0.5g
异丙醇(含量98%) 100ml
此为油红饱和液油红,可长期保存备用。
染色步骤:
(1)冻切片
(2)蒸馏水充分洗涤。
(3)油红稀释液染10-15分钟油红,避光、密封。油红稀释液的配制:
(4)取油红饱和液6毫升油红,加蒸馏水4毫升油红,静置5-10分钟后过滤后使用。
(5)60%乙醇镜下分化至间质清晰。
(6)水洗。
(7)Marry氏苏木素复染核。
(8)水洗。
(9)甘油或甘油明胶封片。
结果:脂肪呈鲜红色,细胞核呈蓝色,间质无色。
注意事项:
1. 油红染色时应避免试剂挥发过多,否则易形成背景沉淀。
2. 60%乙醇分化,应于镜下控制至脂肪组织呈鲜红色,间质无色时为度。
油红o染色有毒吗
油红O染色
油红 O属于偶氮染料油红,是很强的脂溶剂和染脂剂油红,与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类油红,它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置人染液时,染料则离开染液而溶于组织内的脂质(如脂滴)中,使组织内的脂滴呈橘红色。
油红o染色脂滴发黑
原因是油红有沉淀造成油红的。
油红O属于偶氮染料油红,是很强的脂溶剂和染脂剂,与甘油三酯结合呈小脂滴状。因此油红o染色脂滴发黑。
油红O是一类分子式为C26H24N4O分子量为408.495的化学物品。