网上有很多关于检测氯霉素的行业标准的知识,也有很多人为大家解答关于氯霉素检测方法的问题,今天小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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一、检测氯霉素的行业标准
一、检测氯霉素的行业标准
氯霉素检测方法-从-这是我公司现在用的方法,发给你指导。
1.试剂和材料
1.1氯霉素试剂盒,德国r360问答-生物制药公司
1.2乙酸乙酯,分析纯
1.3双蒸水
2.仪器和设备
2.火损害鱼和1微孔板微孔板酶标仪,芬兰L超差头公司。
2.2 8通道移液器,50-300微升
2.3单通道移液器,5-50微升,20-200毫升,100-1000微升,1-5毫升。
2.4离心机。
2.5带真空冷却系统的旋转蒸发器。
2.6液体混合器。
3.试样预处理
3.1样品提取称取约2g(精确至0.01g)蜂蜜于20ml带塞试管中,加入并用4ml双蒸水溶解,再加入4ml乙酸乙酯,在搅拌机中搅拌均匀10min。
将上述样品溶液转移到一个10ml的离心管中,这很容易说,它看起来像一个4000 rpm的离心机,12分钟。
3.2纯化从上述离心管中取1ml乙酸乙酯(云油相当于0.5份样品)至另一试管中,在60以下减压蒸发,用0.5ml缓冲液1溶液作为酶标仪测定的样品溶液。
测量
4.1酶标仪的测定条件
酶标仪测得的波长为450nm。
4.2酶标测定(以下操作在室温20-24下进行)
4.2.1测定前的准备
将氯霉素酶试剂盒附带的所有试剂恢复至20-24的室温。
一室老师擅长六字取样,其中氯霉素酶标和肉附较少氯霉素抗体缓冲液1比1;11、在吸收浓缩液之前,仔细摇匀使其充分混合。
4.2.2标准应用条件的准备;用450微升缓冲溶液稀释50微升标准浓缩液(包含在氯霉素试剂盒中),并混匀。玻璃不能用于塑料瓶。
标准应用溶液1:50微升标准浓缩溶液1用450微升缓冲溶液1稀释oppt。
标准应用溶液2:用450微升缓冲溶液1稀释50ppt的50微升标准浓缩液2。
标准应用溶液3: 50ul标准浓缩溶液3: 450uL缓冲溶液1薄球:150ppt: 150ppt。
标准应用溶液4:用450微升缓冲液1将石三吉普路娜的50微升标准浓缩溶液4稀释至450 ppt。
标准应用溶液5: 50UL标准浓度云起用Bovis收缩溶液5稀释货币,用450uL缓冲溶液1稀释至1350ppt。
标准应用溶液6: 50ul标准浓缩溶液6用450uL缓冲溶液1稀释成4050ppt。
4.2.3最后的祝福。测定程序:
取出实验所需数量的微孔板条,将50ul标准品或加工品样品依次加入各自的微孔中,加入50ul稀释的%@FI。
将酶标记物释放到微孔底部,在每个微孔中加入50ul稀释的抗体溶液并充分混合(轻轻摇动平板,在桌上做环检,使院北的食品液体移动均匀),用薄膜覆盖平板,室温孵育2小时(注意抗体加入过程中不要接触放入孔中的液体,以免交叉污染)。
将孔内液体倒出,将微孔架倒置在吸水纸上轻拍(4次),确保孔内液体完全清除,用250ul蒸馏水灌满孔(轻轻摇动平板,在桌面上做圆周运动),再将微孔内液体倒出,重复操作两次。
注意在洗板的过程中,必须将装有洗涤水的移液器吸头放在微孔板上方1 cm左右,才能抽出洗涤水。
清洗电路板后,立即进行下一步。
操作过程中不要让板孔干燥。
在每个孔中迅速加入50ul基质和50ul显色剂,轻轻摇动平板,在桌上画一个圈。
每周锻炼以混合均匀。
微孔板室温孵育30分钟,避光保存。
在恒温孵育过程中制备反应终止液。
加入100微升反应终止溶液并充分混合。
立即测量。如果不能立即测量,请将其置于暗处,在60分钟内测量450nm处的OD值。
5.试剂空白
用2 ml双蒸水替换样品,按照上述步骤提取。
6结果和计算
6.1绘制标准曲线的方法
钍
0标准吸光度值
计算标准值,以氯霉素浓度(ng/kg)为半对数坐标系作图。该曲线在50-1350纳克/千克(ppt)范围内应呈线性。
每个样品的相应浓度(ng/kg)可从校准曲线中读取。
为了获得样品中氯霉素的实际浓度(ng/kg ),从校准曲线读取的浓度值必须乘以相应的稀释系数。
(可以用Labsystens公司提供的MuLtisKan Ascent软件编制测定程序,对计算机传来的数据进行处理,直接读出样品中氯霉素的浓度值)。
7.方法的检出限和回收率
7.1本方法中氯霉素的检测限为125纳克/千克(ppt)。
7.2回收率:90%
蜂蜜样品的回收实验结果如下所示。
样品背景值(ng/kg)增加值(ng/kg)回收率测定值。
亲爱的。
以上就是关于检测氯霉素的行业标准的知识,后面我们会继续为大家整理关于氯霉素检测方法的知识,希望能够帮助到大家!